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传递窗紫外灯表面消毒效果验证(SOP案例全文完整版)
发布时间:2012-01-25 08:24:26   浏览:11001

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传递窗紫外灯表面消毒效果验证(SOP案例全文完整版)

 

 

1、概述... 3

2、实施日期及时间安排... 3

3、验证小组成员... 3

4、仪器和设备... 3

5、材料与试剂... 3

6、验证过程... 4

7、验证结果记录... 8

8、再验证周期... 9

9、相关SOP. 9

10、QA职责... 9

11、修改事项... 9

12、文档... 9

 

 

1、概述

进入净化车间的零配件或其它物品通过千亿国际官网,进入微生物室的物品通过传递窗,经过紫外消毒后进入微生物室。为了确认传递窗紫外灯的消毒效果,特起草方案对其进行验证。本验证用于生产车间、微生物室、无菌室传递窗紫外灯表面消毒效果检查。

2、实施日期及时间安排

2007年月日开始进行验证。

3、验证小组成员

 

张兴雨

负责验证方案的批准

 

 

王宇

负责验证方案、验证报告的审核、组织验证方案的培训和实施

高江、张英

负责验证方案和验证报告的起草
验证方案的实施

4、仪器和设备

仪器名称

型号或规格

净化工作台

HS-1300-V型

菌落计数器

 

紫外线强度测定仪

 

稳压器

220V

细菌培养箱

SHP-150型

霉菌培养箱

GNP-9270型

5、器材

5.1灭菌刻度吸管(1ml,10ml)

5.2灭菌试管

5.3灭菌平皿

5.4酒精灯

5.5载体:(1.0×1.0cm的玻片)

6、材料与试剂

6.1纯化水 

6.2营养琼脂培养基

6.3改良马丁琼脂培养基

6.4营养肉汤培养基

6.5改良马丁培养基

6.6金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]

6.7枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501]

6.8大肠杆菌[CMCC(B)44 102]

6.9白色念珠菌[CMCC(F)98 001]

6.10稀释液(0.1%吐温80,0.1%蛋白胨溶液)

7、验证过程

7.1 试验环境

    试验在洁净度10 000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行,全过程严格遵守无菌操作。单向流空气区、工作台面及环境定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

    每次操作开始前,开紫外灯照射1小时。

7.2 培养基的制备

7.2.1营养琼脂培养基
配方:

营养琼脂培养基粉 31.0g

纯化水            1000ml

配制:

根据需要量称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中,按配方比例加入纯化水,水浴加热使溶解,调pH至7.1±0.2,分装于适宜容器,置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。

 

7.2.2改良马丁琼脂培养基
配方:

           改良马丁琼脂培养基粉   42.0g

纯化水                  1000ml

     配制:

根据需要量称取改良马丁琼脂培养基粉,按配方比例加入纯化水,水浴加热使溶解,调pH至6.4±0.2,分装于适宜容器,置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。

7.2.3营养肉汤培养基
配方:

           营养肉汤培养基   20g

纯化水            1000ml

配制:

称取营养肉汤培养基20克,加1000ml纯化水,加热溶解,加热至沸,冷却至常温,分装于适宜容器,置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。

7.2.4改良马丁培养基
配方:

           改良马丁培养基粉   28.0g

纯化水              1000ml

配制:

根据需要量称取改良马丁培养基粉,按配方比例加入纯化水,水浴加热使溶解,调pH至6.4±0.2,分装于适宜容器,置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。

 

7.4 方法验证试验

7.4.1辐照强度测定

7.4.1.1开启紫外灯5min后,用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直1m的中心处测量其辐照度值(uW/cm2)。

7.4.1.2测量时,电压应稳定在220V。

7.4.1.3普通型或低臭氧型直管紫外线灯(30W),在灯管下方垂直1m的中心处,新灯管的辐照度值应≥90 uW/cm2 。使用中的灯管的辐照度值应≥70 uW/cm2 ,低于此值者应予更换。

7.4.2照射剂量

表面消毒接受的照射剂量,应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌,照射剂量应达到7.5×103 uW·s/cm2,对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌应达到2.53×104uW·s/cm2。

7.4.2.2照射剂量计算:

照射剂量(uW·s/cm2 )=紫外灯管强度(uW/cm2)×时间(s)

7.4.3 细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定

7.4.3.1菌液的制备   

接种菌种名称

接种培养基

培养条件

金黄色葡萄球菌新鲜培养物

 

营养肉汤培养基

 

 

30~35℃培养18~24小时

大肠杆菌新鲜培养物

枯草芽孢杆菌新鲜培养物

白色念珠菌新鲜培养物

改良马丁培养基

23~28℃培养24~48小时

金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌培养后,将菌液进行活菌计数。

7.4.3.2 将灭菌载体平放于灭菌平皿内,每个载体滴注定量菌悬液,(载体回收菌量达5×105~5×106 cfu/片),涂匀,放37℃培养箱烘干??糇贤獾?min后,将16个染菌玻片平放于灭菌平皿内,水平放于适当距离照射,于4个不同间隔时间(15min、30 min、45 min、60 min)各取出4个染菌玻片,分别投入4个盛有5ml洗脱液试管中,振打80次。

7.4.3.3经适当稀释后,取1ml洗脱液,作平板倾注,每个染菌玻片接种两个,细菌放30~35℃培养48小时作活菌计数,真菌放23~28℃培养72小时作活菌计数。

7.4.3.4阳性对照,除不做照射处理外,取4个染菌玻片,分别投入4个盛有5ml洗脱液试管中,振打80次。余按7.4.2.3同样操作。

7.4.3.5计算杀灭率

                          阳性对照回收菌数-试验组回收菌数

     杀灭率(%)=                                            ×100%

                               阳性对照回收菌数

7.4.3.6判定标准     对指示菌杀灭率≥99.9%判为消毒合格。

8、验证结果记录:

附件1. 试验菌数量测定原始记录

8、再验证周期

传递窗构造或紫外灯管放置位置发生改变时。

9、相关SOP

文件编号

文件名称

CK/ZY-059

紫外灯、照明灯管理制度

CK/ZY-012

物料进入控制区程序和清洁管理规定

CK/ZY-049

实验室操作制度

CK/ZY-068

初始污染验证方案

020343

培养基的配制

020344

细菌的接种、传代和保存

 

参考:自净式传递窗验证过程中的性能确认

10、文档

所有的相关文档都应该保留至少5年,这些文档应包括如下内容:

原始方案、修改后的方案(如果有的话)、偏差报告、原始数据、原始报告和最终报告、其中,报告应该包括以下内容:

记录的原件(或复印件)、测试项目及条款、实验开始和结束的日期、材料和方法描述、出现的偏差描述(如果有的话)、实验结果。

 

整理:千亿国际官网  黄贞民-13570963007

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